Methylation status of CDH1 gene in samples of gastric mucous from brazilian patients with chronic gastritis infected by Helicobacter pylori

CONTEXT: Gastric cancer is one of the top list of cancer types that most leads to death in Brazil and worldwide. Helicobacter pylori(H. pylori) is a class I carcinogen and infect almost 90 percent of chronic gastritis patients. Some genotypes confer different virulent potential to H. pylori and can increase the risk of gastritis development. Methylation of CpG islands can inactivate tumor suppressor genes and therefore, it can be involved in the tumorigenic process. CDH1 is a tumor suppressor gene that encodes the E-cadherin protein, which is important in maintaining cell-cell contacts. The inactivation of this gene can increase the chance of metastasis. Promoter methylation of CDH1 at early steps of gastric carcinogenesis is not yet completely understood. OBJECTIVE: In this study, we investigated the methylation status of CDH1 in chronic gastritis samples and correlated it with the presence of H. pylori. METHODS: Sixty gastric mucosal biopsies were used in this study. The detection of H. pylori was performed with the PCR primers specific to urease C gene. H. pylori genotyping was performed by PCR to cagA and vacA (s and m region). The methylation status of these gene CDH1 was analyzed using methylation-specific polymerase chain reaction and direct sequencing of the PCR products was performed using primers methylated and unmethylated in both forward and reverse directions. RESULTS: H. pylori was detected in 90 percent of chronic gastritis samples; among these 33 percent were cagA positive and 100 percent vacA s1. The genotype vacA s2/m1 was not detected in any sample analyzed. Methylation of CDH1 was detected in 63.3 percent of chronic gastritis samples and 95 percent of them were also H. pylori-positive. CONCLUSION: This work suggests that CDH1 gene methylation and H. pylori infection are frequent events in samples from Brazilian patients with chronic gastritis and reinforces the correlation between H. pylori infection and CDH1 inactivation ...

CONTEXTO:O câncer gástrico é uma das principais neoplasias que causam o óbito no Brasil e no mundo. Helicobacter pylori é um carcinógeno do tipo I relacionado à gastrite crônica. Diferenças no grau de virulência de suas cepas levam a maior risco de desenvolvimento de doenças gástricas. A metilação de ilhas CpGs está envolvida com o processo de tumorigênese em diferentes tipos de câncer. CDH1 é um gene supressor tumoral que, quando inativado, pode aumentar as chances de metástase. A metilação deste gene em estágios precoces da carcinogênese gástrica ainda não é totalmente compreendida. OBJETIVO: Investigar o padrão de metilação do gene CDH1 em amostras de gastrites crônicas e correlacionar com a presença do H. pylori. MÉTODOS: Foram usadas 60 biopsias de mucosas gástricas. A detecção de H. pylori foi realizada por PCR para o gene da urease C e a genotipagem com PCR para os genes cagA e vacA (região s e m). O padrão de metilação do gene CDH1 foi analisado usando a técnica de PCR e específica para a metilação e sequenciamento direto dos produtos de PCR. RESULTADOS: A bactéria H. pylori foi detectada em 90 por cento das amostras de gastrites crônicas; destas, 33 por cento portavam o gene cagA e 100 por cento vacA s1. O genótipo vacA s2/m1 não foi detectado nas amostras analisadas. Metilação de CDH1 foi detectada em 63,3 por cento das amostras de gastrites e 95 por cento delas eram portadoras de H. pylori. CONCLUSÃO: Os resultados deste estudo sugerem que a metilação em CDH1 e a infecção pelo H. pylori são eventos frequentes em amostras de pacientes brasileiros com gastrite crônica e reforça a correlação entre infecção por H. pylori e inativação do gene CDH1 em estágios precoces da tumorigênese gástrica.

Infecção por Helicobacter pylori e câncer gástrico: freqüência de cepas patogênicas cagA e vacA em pacientes com câncer gástrico / Helicobacter pylori and gastric cancer: distribution of cagA and vacA genotypes in patients with gastric carcinoma

INTRODUÇAO: Apesar da alta freqüência de infecção por Helicobacter pylori na população, somente uma minoria de indivíduos desenvolve câncer gástrico. É provável que a colonização da mucosa por cepas patogênicas, levando a maior agressão e inflamação da mucosa seja um dos elos da cadeia de eventos da oncogênese gástrica. OBJETIVOS: Investigar a freqüência de cepas patogênicas cagA e vacA do H. pylori em pacientes com câncer gástrico. MATERIAL E MÉTODOS: Foram estudados retrospectivamente 42 pacientes com câncer gástrico. A infecção por H. pylori foi avaliada por exame histológico e pelo PCR para identificação dos genótipos cagA e vacA em amostras de material fixado em formalina e incluído em parafina. RESULTADOS: A análise histológica permitiu a visualização direta do H. pylori em 85,7 por cento dos casos, e o método de PCR para o gene urease C demonstrou a presença de DNA da bactéria em 95 por cento dos casos. O gene cagA foi detectado em amostras de 23 pacientes (54,7 por cento) com câncer gástrico. O alelo s1 do gene vacA foi identificado em amostras de 24 pacientes (57,1 por cento) e o alelo m1, em amostras de 26 pacientes (61,9 por cento). Os alelos s1 e m1 foram identificados simultaneamente em 24 pacientes (57,1 por cento). O alelo s2 foi identificado em amostras de quatro pacientes (9,5 por cento), e o alelo m2, em amostras de três pacientes (7,1 por cento). A freqüência de infecção pelo Helicobacter pylori foi similar em ambos os tipos histológicos de câncer gástrico (intestinal e difuso). CONCLUSÕES: Os resultados confirmam a relevância dos genótipos patogênicos cagA e vacA do H. pylori para lesões orgânicas significativas tais como o câncer gástrico, sugerindo a participação dessa bactéria na cadeia de eventos da oncogênese gástrica.